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Università del Texas Facoltà di Medicina

Programma di laurea in Biologia cellulare

Traduzioni di Natale Marzari

 

 

Substrutture mitocondriali

I mitocondri contengono due membrane, separate da uno spazio. Ambedue sono "unità di membrana" tipicamente strutturate.  All'interno dello spazio incluso dalla membrana interna c'è la matrice. Questa appare moderatamente densa e vi  si possono trovare filamenti di DNA, ribosomi, o piccoli granuli. I mitocondri posseggono la codifica per costruire alcune delle proteine e gli strumenti molecolari per farle. Il disegno sopra mostra il diagramma delle membrane mitocondriali e dei compartimenti inclusi.

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come sono organizzati i mitocondri per essere centrali energetiche?

Il cibo che noi mangiamo viene ossidato per produrre elettroni ad energia elevata che sono convertiti per immagazzinare energia. Questa energia viene immagazzinata in legami fosfati ad alta energia in  una molecola chiamata adenosin-trifosfato, o ATP. L'ATP è convertita da adenosin-difosfato con l'aggiunta di un gruppo fosfato con il legame ad alta energia. Varie reazioni nella cellula possono sia usare energia (ottenuta dalla riconversione dell'ATP ADP, rilasciando il legame ad alta energia) o produrla (per mezzo del quale la ATP è prodotta dall'ADP).

Passi dalla glicolisi alla catena di trasporto degli elettroni. perché sono importanti i mitocondri?

Analizziamo separatamente ciascuno dei passi così da poter vedere come il cibo si trasforma in pacchetti di energia ATP e acqua. Il cibo che noi mangiamo deve inizialmente essere convertito nelle sostanze chimiche basilari che le cellule possano usare. Alcuni dei cibi energeticimente  migliori  contengono zuccheri o carboidrati...il pane ad esempio. Usando questo come esempio, gli zuccheri sono spezzati da enzimi che li scompongono in uno zucchero di forma più semplice che si chiama glucosio. Quindi, il glucosio entra nella cellula per mezzo di molecole speciali presenti nella membrana chiamate "trasportatori del glucosio".

Una volta all'interno della cellula, il glucosio viene spezzato per produrre ATP in due modi. Il primo modo non richiede ossigeno e si chiama metabolismo anaerobico. Questo processo viene chiamato glicolisi e avviene nel citoplasma all'esterno dei mitocondri. Durante la glicolisi, il glucosio viene decomposto in piruvato. Altri cibi come i grassi possono anche essere decomposti per essere usati come combustibile (vedere il disegno sotto). ciascuna reazione viene designata per produrre alcuni ioni idrogeno (elettroni) che possono essere usati per produrre pacchetti energetici (ATP). comunque, solo 4 molecole di ATP possono essere formate da una molecola di glucosio attraverso questa modalità. Questo è il motivo per  cui i mitocondri e l'ossigeno sono così importanti. Noi dobbiamo continuare il processo di decomposizione con il ciclo di Krebs all'interno dei mitocondri al fine di produrre abbastanza ATP per tutte le funzioni cellulari.

I fatti che avvengono all'esterno e all'interno dei mitocondri sono rappresentati nel disegno sopra. Il piruvato viene trasportato all'interno dei mitocondri e là viene convertito in  Acetyl co-A che entra nel ciclo di Kreb. La prima reazione produce biossido di carbonio poiché essa comporta la rimozione di un atomo di carbonio dal piruvato.

 

come lavora il ciclo di di Kreb? 

L'idea che sta dietro la respirazione nei mitocondri è l'uso del ciclo di Krebs (anche chiamato il ciclo del acido citrico) per ottenere più elettroni possibile dal cibo che mangiamo. Questi elettroni (nella forma di ioni di idrogeno) sono quindi usati per muovere la pompa che produce l'ATP. L'energia fornita dall'ATP viene allora usata per tutti i tipi di funzioni cellulari come movimento, trasporto, entrata ed uscita di prodotti, divisione, ecc. La spiegazione seguente è molto semplificata e si concentra solo sui processi dal piruvato attraverso il ciclo. comunque , essa illustra il processo e le sue funzioni.

Per funzionare il ciclo di Kreb, necessita di diverse importanti molecole in aggiunta a tutti gli enzimi. Questa presentazione si focalizzerà sui donatori, i trasportatori e gli accettori di elettroni. Innazitutto, occorre piruvato, che viene prodotto attraverso la glicolisi dal glucosio. Poi, occorrono alcune molecole che trasportino gli elettroni. ce ne sono di due tipi: una si chiama nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) e l'altra dinucleotide adenina flavina (FAD+). La terza molecola, ovviamente è l'ossigeno.

Il piruvato è una molecola con tre atomi di carbonio. Dopo che è entrato nei mitocondri, esso viene spezzato a molecola con 2 atomi di carbonio da uno speciale enzima. Qui viene rilasciata anidride carbonica. La molecola con 2 atomi di carbonio è chiamata Acetil co-A ed entra nel ciclo di Krebs congiungendosi ad una molecola con 4 atomi di carbonio chiamata ossaloacetato. Dove le due molecole vengono ionizzate, si produce cos' una molecola con 6 atomi di carbonio chiamata acido citrico (2 atomi di carbonio + 4 atomi di carbonio = 6 atomi di carbonio). Questo è il punto dove il ciclo dell'acido citrico prende il suo nome....dalla prima reazione che produce acido citrico. L'acido citrico è poi gradualmente spezzato e modificato e, nel procedimento, vengono rilasciati ioni idrogeno e molecole di carbonio. Le molecole di carbonio vengono convertite in diossido di carbonio e gli ioni idrogeno sono trasportati dai NAD E FAD (vedi sotto). Alla fine, il processo produce nuovamentye i 4 atomi di carbonio ossalacetato. La ragione per cui questo processo è chiamato ciclo, è perché finisce sempre dove era partito..... con ossacetato disponibile per combinarsi con altro acetil-coA.

cosa è la "fosforilazione ossidativa"?

Innanzitutto alcune definizioni basilari. Quando si sottraggono ioni idrogeno o elettroni ad una molecola, si "ossida"quella molecola. Quando si forniscono ioni idrogeno o elettroni ad una molecola, si "riduce" quella molecola. Quando si forniscono molecole di fosfato ad una molecola, si "fosforilizza" quella molecola. così, la fosforilazione ossidatitiva (molto semplicemente) è il processo che asporta l'idrogeno rimovibile da una molecola ed aggiunge atomi di fosfato da un'altra molecola. come fa questo a riguardare i mitocondri???

Quando funziona il ciclo di Kreb, gli ioni idrogeno (o elettroni) sono donati alle due molecole in 4 delle fasi. Essi sono trasportati sia da NAD che da FAD e queste molecole trasportatrici diventano NADH e FADH (poiché esse ora trasportano uno ione idrogeno). La figura mostra cosa accade dopo.

 

Questi elettroni sono trasportati chimicamente alla catena di trasporto degli elettroni che si trova nelle creste mitocondriali (vedi i disegni sopra e sotto questo paragrafo). La NADH e la FADH essenzialmente servono come un traghetto nel piano laterale della membrana che si diffondono da un complesso ad un altro. A ciascun sito una pompa  idrogeno (o protone) che trasferisce idrogeno da un punto della membrana ad un altro. Questo crea un gradiente attraverso la membrana interna con una più alta concentrazione di ioni idrogeno nello spazio tra le creste (questo è lo spazio tra le membrane interna ed esterna).

Il disegno seguente mostra i complessi singolarmente nella catena di trasporto degli elettroni. Gli elettroni sono trasportati da un complesso all'altro dall'ubiquinone e dal citocromo c

La terza pompa nella serie catalizza il trasferimento degli elettroni all'ossigeno per produrre acqua. Questa pompa chemiosmotica crea un gradiente protonico elettrochimico attraverso le membrane che viene usato per condurre la "macchina produttrice di energia"... la sintetasi della ATP. Questa molecola viene ricavata da piccole particelle elementari  che si proiettano dalle creste. Il disegno sotto mostra una particella elementare. Vedi anche la sua proiezione dalla membrana interna nelle figure precedenti che mostrano una visione delle creste.

 

 

come detto sopra, questo processo richiede ossigeno ed è per questo che si chiama "metabolismo aerobico". La sintetasi della ATP usa l'energia del gradiente degli ioni idrogeno (anche chiamati protoni) per formare ATP da ADP e fosfato. Esso produce anche acqua dall'idrogeno e dall'ossigeno. Pertanto, ciascun compartimento nel mitocondrio è specializzato in una fase di queste reazioni.


Qui è come la ossidazione è abbinata alla fosforilazione:

Da osservare:    NAD e FAD rimuovono gli elettroni che sono donati durante alcune delle fasi del ciclo di Krebs o ciclo dell'acido citrico. Quindi, essi trasportano gli elettroni alle pompe di trasporto degli elettroni e li cedono alle pompe. così, NAD e FAD sono "ossidati" poiché essi cedono gli ioni idrogeno dalle pompe. Le pompe allora trasportano gli ioni idrogeno allo spazio tra le due membrane dove essi si accumulano in una concentrazione abbastanza elevata da alimentare le pompe della ATP. con sufficiente combustibile, essi "fosforilano" la ATP. Questo si intende come "ossidazione" accoppiata alla "fosforilazione".

Gli ioni idrogeno che vengono pompati indietro nella matrice dalla pompa della ATP poi si combinano con l'ossigeno per produrre acqua. E questo è molto importante poiché, senza l'ossigeno, essi si accumulerebbero ed il gradiente di concentrazione renderebbe necessario attivare le pompe ATP non consentendo alle pompe di lavorare.

Dunque, perché abbiamo bisogno dei mitocondri?

L'idea di fondo dietro questo processo è quella di trarre più ATP possibile dal glucosio (o da altro alimento). Se non abbiamo ossigeno, noi otteniamo solo 4 molecole di pacchetti energetici di ATP per ciascuna molecola di glucosio (nella glicolisi). Quindi, se abbiamo ossigeno, allora avviamo il ciclo di Krebs per produrre molti più ioni idrogeno che possono attivare quelle pompe dell'ATP. Dal ciclo di Krebs si ottengono 24-28 molecole di ATP da una molecola di glucosio convertita in piruvato ( più le 4 molecole ricavate dalla glicolisi). Dunque, si può vedere come si possa trarre più energia da una molecola di glucosio se i nostri mitocondri funzionano e se abbiamo ossigeno.


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Importanza delle creste

Ora si può apprezzare l'importanza delle creste... non solo poiché esse contengono ed organizzano la catena di trasporto degli elettroni e le pompe dell'ATP, ma anche perché servono a separare la matrice dallo spazio che conterrà gli ioni idrogeno, consentendo il necessario gradiente per azionare la pompa. Quando l'analisi si focalizzerà su come i mitocondri muovono le proteine all'interno della matrice, si vedrà un'altra ragione per cui questo gradiente ioni idrogeno (protoni) sia così importante!

come mostrato nella immagine sottostante, le molecole nella catena di trasporto degli elettroni sono formati come un gruppo organizzato nella cresta. Queste saranno più numerose nei mitocondri che sono più attivi nella produzione di ATP. Pertanto, esse possono aumentare la densità di queste membrane se le necessità lo richiedono. I muscoli del volo del colibrì ha molte creste in ogni mitocondrio, a causa delle sue grandi necessità energetiche.

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Struttura e funzione della membrana interna e particelle elementari.

I mitocondri possono essere separati e la membrana interna e quella esterna possono essere dissociate. Da questo risulterà una frazione contenente solo la membrana interna e la matrice. Questa può essere chiamata "mitoplastide". Questi sono funzionanti e ci hanno aiutato a capirne di più sulla compartimentazione dei mitocondri. Uno può aprire il mitoplastide e vedere la superficie interna delle membrane dopo averne fatto la replica negativa. Questa replica ricopre ogni proiezione della superficie. con questo metodo, uno può vedere le particelle elementari proiettate sulla superficie interna delle creste. Queste sono le molecole di ATP sintetasi (o particelle elementari) discusse nella sezione precedente. 

L'immagine nella sezione precedente mostrava il citocromo c depositato sulla superficie esterna della membrana interna. Esso è attaccato debolmente ad una proteina periferica situata nello spazio contenuto nelle creste. Nei fatti, se la membrana esterna è rimossa, spesso si perde il citocromo c e deve essere rimpiazzato per promuovere le funzioni dei mitoplastidi.

 

 

come sanno i citochimici che la citocromo c è sulla membrana interna? Possiamo fare esami citochimici per questo citocromo ed il risultato viene mostrato in questa figura. Notare che i prodotti della reazione enzimatica sono confinati nelle creste ed infatti delineano le creste. Sfortunatamente, come nella maggior parte degli enzimi della citochimica, la reazione produce diffusioni? e sembra riempire lo spazio interno alla membrana. Questo riflette l'orientamento del citocromo c. Esso viene trovato nello spazio fra le membrane delle creste il che suggerisce che esso sia necessaria la sua distribuzione sulla membrana della creste, più rapidamente della distribuzione interno (all'opposto dell particelle elementari, o della ATP sintetasi).

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Last updated: 06/06/10
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